|
|
|
หัวเรื่อง:ไม่มีชื่อไทย (ชื่ออังกฤษ : Cloning, Expression, Purification, Determining Activity of Recombinant HIV-1 Reverse Transcriptase) ผู้เขียน:กัญจน์ ศิลป์ประสิทธิ์, รัตน์สุภา ธรรมาภรณ์, ดร.สุภา หารหนองบัว, ศาสตราจารย์, ดร.เกียรติทวี ชูวงศ์โกมล, รองศาสตราจารย์ สื่อสิ่งพิมพ์:pdf AbstractThe spreading of HIV infection is still a serious epidemic disease in Asia, including Thailand, especially by transmission from mother to child and drug resistance HIV. Therefore, discovery of a new drug is the hope for curing the drug resistant strains. Drug discovery needs atomic resolution structure of the target protein, reverse transcriptase. In this paper, we reported the cloning, expression, purification and activity assay of HIV-1 reverse transcriptase in E. coli. The yield of homogeneous recombinant HIV-1 reverse transcriptase enzyme was 2 mg/liter culture. The enzyme activity assay using fluorometric method and PicoGreen dye was convenient and rapid, and Km, determined by this method was 10.51 ? 2.58 ?M dTTP substrate. The fluorometric assay can be further used for high-throughput inhibitor screening application. |
|
|
|
|